Skip to content

Zastosowanie podtypu molekularnego w nadzorze dla Salmonella enterica Serotyp Typhimurium cd

2 miesiące ago

449 words

Jako standard wybrano szczep S. enterica serotyp typhimurium (MN # E97000847). Żele przeprowadzono przy użyciu buforu 0,5 x TBE (45 mmol TRIS zasada, 45 mmol kwas borowy i mmol EDTA) w 14 ° C, liniowy wzrost czasów przełączania (z 10,3 do 64,0 sekund) w okresie 22 godzin, kąt przełączania 120 stopni i gradient 6,0 V na centymetr. Żele zabarwiono następnie 0,01% roztworem bromku etydyny (Sigma, St. Louis), poddano cyfryzacji (system Gel Doc 1000, Bio-Rad) i sfotografowano za pomocą światła ultrafioletowego z nieruchomej pozycji kamery. Analiza żelu i interpretacja wyników PFGE
Rycina 1. Rycina 1. Wzory na elektroforezie w żelu pulsującym (PFGE) wybranych izolatów Salmonella enterica Serotyp Typhimurium. Ścieżki 1, 5 i 10 pokazują standardowy szczep stosowany jako wzorzec masy cząsteczkowej (jak pokazano po lewej stronie). Pasy 2, 3 i 7 przedstawiają izolaty z trzech oddzielnych ognisk. Ścieżka 4 przedstawia wspólny wzorzec PFGE związany z izolatami, które były oporne na ampicylinę, chloramfenikol, streptomycynę, sulfizoksazol i tetracyklinę. Ścieżka 6 przedstawia najpowszechniejszy wzór PFGE związany z izolatami, które były oporne na ampicylinę, kanamycynę, streptomycynę, sulfizoksazol i tetracyklinę. Ścieżki 8 i 9 pokazują szczepy związane z sporadycznymi infekcjami.
Profile PFGE zostały porównane przy użyciu współczynnika Jaccard i oprogramowania Molecular Analyst Plus (Bio-Rad). Aby zostać uznanym za zgodny, wzorce DNA nie mogą różnić się od siebie o więcej niż procent w odniesieniu do masy cząsteczkowej. Mecze zostały potwierdzone wizualnie na podstawie znalezienia dokładnych dopasowań wszystkich pasm w zakresie od 30 do 1000 kb (rysunek 1). W celu identyfikacji ognisk i klastrów oraz w celu porównania izolatów opornych na wiele leków, wykorzystaliśmy wytyczne Tenover i in. interpretować wzory restrykcji DNA generowane przez PFGE.13
Testy wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe
Począwszy od 1995 r. Ustanowiono program monitorujący oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe. Co piąty izolat salmonelli otrzymany przez publiczne laboratorium zdrowia został przetestowany pod kątem wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe. Izolaty od nierezydentów z Minnesoty, duplikaty izolatów i wszystkie oprócz pierwszego izolatu z badań epidemii zostały usunięte z analizy. Przeprowadzono testy dyfuzyjne na agarze Muellera-Hintona o standardowych średnicach strefy ustalonych przez Komitet ds. Klinicznych Standardów Laboratoryjnych.14 Panel wrażliwości przeciwdrobnoustrojowej zawierał ampicylinę, cefotaksym, cefalotynę, chloramfenikol, ciprofloksacynę, gentamycynę, kanamycynę, kwas nalidyksowy, streptomycynę. tetracyklinę i trimetoprim-sulfametoksazol. Sulfisoksazol został dodany do panelu w 1998 r. I oceniano wrażliwość wybranych izolatów opornych na wiele leków. Wybrane izolaty oporne na wiele leków wysłano do CDC w celu typowania bakteriofagowego.
Wyniki
Charakterystyka izolatów
Od 1994 r. Do 1998 r. Odnotowano 998 przypadków S. typica typhimurium wśród mieszkańców stanu Minnesota (4,4 przypadków na 100 000 osobolat). Najwyższy wskaźnik dotyczący wieku był wśród dzieci poniżej piątego roku życia: 13,5 przypadków na 100 000 osobolat
[więcej w: szmer skurczowy, oligobiopsja, przewód stenona ]
[podobne: polimedica zgierz, znieczulenie dolędźwiowe, gegoart ]

0 thoughts on “Zastosowanie podtypu molekularnego w nadzorze dla Salmonella enterica Serotyp Typhimurium cd”